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AHSI e Agilent Technologies: Alla scoperta delle funzioni delle cellule con l’analisi metabolica cellulare
Analisi metabolica cellulare: come prevedere il comportamento delle cellule
Il metabolismo energetico è alla base dei cambiamenti che avvengono all’interno della cellula. Per questo, è una strada comprovata per acquisire nuove conoscenze sulle funzioni biologiche sia in condizioni fisiologiche sia patologiche. Attraverso la fenotipizzazione e il metabolismo energetico cellulare, infatti, è possibile comprendere a fondo le funzioni cellulari e prevederne il comportamento nel corso del tempo.
Gli analizzatori Seahorse XF misurano il tasso di consumo di ossigeno e il tasso di acidificazione extracellulare in vivo in tempo reale.
ANALIZZATORI AGILENT
- ottimizzazione delle condizioni sperimentali prima dello “scale up”;
- cellule immunitarie rare;
- “sorted cells” e/o “primary cells”;
- linee cellulari;
- campioni ex-vivo.
- studi di dosaggio/risposta;
- piccoli organismi modello (zebrafish);
- isole pancreatiche;
- calcolo della dipendenza della produzione di energia cellulare in substrati mitocondriali.
- screening fenotipici;
- screening tossicologici;
- contemporaneità di analisi in diverse condizioni;
- studi di dosaggio/risposta, sferoidi (con le specifiche micro piastre), calcolo della dipendenza della produzione di energia cellulare in substrati mitocondriali.
Questa linea strumentale è l’ideale per andare oltre la semplice analisi di ciò che sono le cellule e ottenere così un quadro chiaro di quali siano invece le loro funzioni. Scarica la brochure e scopri tutti i dettagli qui.
Diversi i campi di applicazione:
- Cancro e immunologia
- Attivazione delle cellule immunitarie
- Immunoterapia
- Neurodegenerazione
- Obesità, diabete e disturbi del metabolismo
- Funzionamento mitocondriale e tossicità
AHSI S.p.A. è distributore esclusivo in Italia di Agilent Technologies, che dal 1° dicembre 2021 ha acquisito Biotek Technologies.
Proprio Agilent e Biotek hanno elaborato una soluzione integrata che combina l’analisi e le tecnologie dell’imaging metabolico cellulare.
Questa soluzione ottimizzata integra i dispositivi Seahorse XFe96/XFe24 di Agilent con i lettori multi-mode e di imaging per micropiastre Cytation (modelli 1, 5, 7 e C10), permettendo una correlazione lineare tra il numero di cellule per pozzetto e i valori di OCR/ECAR misurati.
LETTORI MULTI-MODE E DI IMAGING PER MICROPIASTRE
I campi applicativi nell’analisi e nella ricerca: installazione al Policlinico di San Donato
1. Analisi dei cardiomiociti nel modello di riperfusione ischemica
È noto come, dopo un infarto del miocardio, sia necessaria una tempestiva riperfusione per salvare la regione ischemica; tuttavia, la stessa riperfusione è anche un importante contributo al danno tissutale finale. Attualmente, non è disponibile una terapia clinicamente rilevante per ridurre il danno da ischemia-riperfusione (IRI). Sebbene molti farmaci abbiano mostrato risultati promettenti nel ridurre l’IRI negli studi preclinici, nessuno di questi farmaci ha dimostrato benefici in ampi studi clinici. I modelli in vitro che utilizzano cardiomiociti isolati consentono di studiare l’effetto diretto della terapia sui cardiomiociti. Inoltre, la disponibilità di cardiomiociti derivati da cellule staminali pluripotenti indotte dall’uomo (hIPS-CMs) offre l’opportunità di ricapitolare la fisiologia umana in vitro. Le piattaforme di ingegneria tissutale possono promuovere la maturazione dei cardiomiociti per una risposta fisiologica più predittiva e possono essere ulteriormente migliorate per tenere conto delle popolazioni eterogenee di pazienti osservate negli ambienti clinici e facilitare l’identificazione delle terapie. In tal modo, gli attuali studi preclinici possono essere ulteriormente sviluppati utilizzando gli strumenti attualmente disponibili per ottenere test farmacologici predittivi e una migliore comprensione dell’IRI.
2. Congelamento PBMC
Le cellule mononucleate del sangue periferico vivo (PBMC) possono essere congelate e scongelate per analisi successive aggiungendo e rimuovendo un crioprotettore, come il dimetilsolfossido (DMSO). Le cellule mononucleate da sangue periferico, o Total Nuclear Cells, sono cellule mesenchimali staminali che intervengono nei processi di rigenerazione e riparazione dei tessuti. Analogamente alle cellule prelevate dal tessuto adiposo, sono cellule primitive non specializzate, che possono trasformarsi in tipi diversi di cellule del corpo, a seconda delle necessità. La loro funzione è quella di sostituire il tessuto danneggiato in seguito a un trauma o all’invecchiamento.
La normalizzazione cellulare e la soluzione per il conteggio automatico delle cellule dall’integrazione di Seahorse e Cytation
L’utilizzo combinato del Seahorse XFe96 e del Cytation1 (nel caso del Policlinico di San Donato) è di fondamentale importanza per sviluppare e ampliare gli studi e le attuali conoscenze. Questa integrazione strumentale garantisce una miglior comprensione dei fenomeni metabolici che sono alla base dei due campi applicativi sopra esposti. Infatti, l’analisi “in vivo” e in tempo reale misura la respirazione mitocondriale e la glicolisi per fornire informazioni funzionali sullo stato metabolico delle cellule.
ANALIZZATORI PER LA NORMALIZZAZIONE
LETTORI MULTI-MODE E DI IMAGING PER LA NORMALIZZAZIONE
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Team AHSI S.p.A.
