Workflow cellulare

WORKFLOW CELLULARE: SOLUZIONI DALLA PREPARAZIONE ALLA CONSERVAZIONE

Le colture cellulari vengono utilizzate nella ricerca come modello sperimentale in innumerevoli tipi di esperimenti. Svolgono un ruolo fondamentale in diverse applicazioni:

• analisi dell’effetto dei farmaci;
• verifica della mutagenicità e cancerogenicità delle sostanze;
• studio dell’espressione genica;
• produzione di OGM, organismi geneticamente modificati;
• produzione di anticorpi monoclonali;
• produzione proteine ricombinanti;
• produzione vaccini;
• studio della risposta immunitaria;
• studio dei processi di base delle cellule (replicazione, morte cellulare programmata, necrosi, produzione di energia, duplicazione del DNA).

QUALI STRUMENTI SERVONO NEL WORKFLOW CELLULARE

FASE 1: PREPARAZIONE

• CAPPE A FLUSSO LAMINARE:
  • • manipolazione sterile delle cellule coltivate in vitro
    • ambiente di lavoro pulito per le cellule
    • operatore protetto dagli aerosol
    • provviste di filtri HEPA

• AGITATORI MAGNETICI E VORTEX:
  • • sospensione delle cellule
    • miscela dei reagenti di un test
    • miscela di un campione sperimentale e un diluente

• SHAKER ORBITALI:
  • • agitazione e miscelazione

• BAGNI RISCALDANTI AD ACQUA:
  • • scongelamento delle criovials contenenti le cellule di interesse

• SISTEMI PER LA PRODUZIONE DELL’ACQUA:
  • • produzione di acqua di tipo I e II per le soluzioni necessarie in laboratorio

• CENTRIFUGHE:
  • • raccolta del campione

• AUTOCLAVI:
  • • sterilizzazione di soluzioni, brodi di coltura per batteri, puntali, etc.

• PIPETTE E PIPETTATORI:
  • • sterili e monouso
    • manipolazione, aliquotazione e trasferimento dei diversi volumi di campione da un supporto all’altro

FASE 2: COLTURA E CRESCITA

• CAPPE A FLUSSO LAMINARE:
  • • manipolazione sterile delle cellule coltivate in vitro
    • ambiente di lavoro pulito per le cellule
    • operatore protetto dagli aerosol
    • provviste di filtri HEPA

• BIOREATTORI:
  • • produzione su scala pilota
    • produzione su scala produttiva

• CENTRIFUGHE:
  • • raccolta del campione

• INCUBATORI A CO₂:
  • • coltivazione delle cellule di mammifero

• INCUBATORI MICROBIOLOGICI:
  • • coltivazione delle cellule batteriche statiche
    • dotazione opzionale di sistema di refrigerazione

• INCUBATORI CON AGITAZIONE:
  • • coltivazione colture batteriche o di cellule di insetto

• ISOLATORI:
  • • maninpolazione campioni di ricerca in ambiente sterile

• PIPETTE E PIPETTATORI:
  • • sterili e monouso
    • manipolazione, aliquotazione e trasferimento dei diversi volumi di campione da un supporto all’altro

• CAPPE A FLUSSO LAMINARE:
  • • manipolazione sterile delle cellule coltivate in vitro
    • ambiente di lavoro pulito per le cellule
    • operatore protetto dagli aerosol
    • provviste di filtri HEPA

• CENTRIFUGHE DA BANCO:
  • • gravità fino a 25.000xg con volumi medio-piccoli
    • preparazione di campioni in coltura cellulare, per protocolli di chimica clinica e per la centrifugazione di micropiastre

• ULTRACENTRIFUGHE:
  • • gravità fino a 1.000.000xg con volumi piccoli
    • centrifughe in grado di raggiungere elevatissimi valori di accelerazione di gravità, idonee per la separazione, preparazione e purificazione dei campioni

• SUPERCENTRIFUGHE:
  • • gravità fino a 100.000xg con volumi medi
    • centrifughe da pavimento ad alta capacità, in grado di processare fino a 4 o 6 litri

• CENTRIFUGHE DA BIOPROCESSO:
  • • gravità fino a 10.000xg con volumi grandi
    • sviluppo e implementazione di metodi di bioprocesso di raccolta, separazione e purificazione ad alta qualità che richiedono riproducibilità e tracciabilità corsa dopo corsa
• PIPETTE E PIPETTATORI:
  • • sterili e monouso
    • manipolazione, aliquotazione e trasferimento dei diversi volumi di campione da un supporto all’altro

• LAVATORI DI MICROPIASTRE:
  • • automatizzazione e ottimizzazione della riproducibiltà delle diverse fase di lavaggio
    • a strip o a piastra completa

• LETTORI MULTI-MODE: Gestione delle letture in
  • • assorbanza
    • fluorescenza
    • luminescenza

• ANALIZZATORI DEL METABOLISMO CELLULARE:
  • • analisi in tempo reale del processo metabolico delle cellule in vivo
    • misurazione consumo di ossigeno
    • misurazione acidificazione cellulare

• DISPENSATORI DI MICROPIASTRE:
  • • dispensazione di campioni/reattivi

• SISTEMI DI IMAGING:
  • • ottenimento di immagini delle cellule in tempo reale

• LETTORI SINGLE MODE:
  • • coltivazione delle cellule batteriche statiche

• CITOFLUORIMETRI:
  • • Rilevazione, identificazione e conteggio di specifiche cellule/particelle all’interno di una popolazione cellulare/sospensione di materiale biologico
    • Identificazione strutture intracellulari
    • Studiare processi biologici, sia fisiologici che patologici

• FRIGORIFERI +4°C, CONGELATORI -20°C, -30°C, -35°C, -40°C, FRIGOCONGELATORI +4°C, -20°C:
• • • conservazione di reagenti, terreni di coltura, DNA, vaccini, farmaci, etc.

• ULTRACONGELATORI -80 °C:
  • • conservazione a lungo termine di DNA, RNA, ceppi batterici, vaccini, etc.

• CONGELATORI MECCANICI -150 °C:
  • • stoccaggio a bassissime temperature, in alternativa allo stoccaggio in azoto liquido, di linee cellulari e materiale sensibile

• CONGELATORI A DISCESA PROGRAMMATA:
  • • preparazione dei campioni cellulari prima della conservazione criogenica, garantisce la massima vitalità delle cellule, secondo procedure standardizzate e ripetibili

• CONTENITORI DI AZOTO:
  • • sistemi di stoccaggio in vapori d’azoto per conservazione a lungo termine delle cellule.
    • disponibili in diverse capacità, a riempimento manuale o automatico
• SISTEMI DI MONITORAGGIO:
  • • monitoraggio 24/7 di temperatura e altre grandezze chimico-fisiche
    • tecnologia LoRaWAN