Workflow cellulare

WORKFLOW CELLULARE: SOLUZIONI DALLA PREPARAZIONE ALLA CONSERVAZIONE

Le colture cellulari vengono utilizzate nella ricerca come modello sperimentale in innumerevoli tipi di esperimenti. Svolgono un ruolo fondamentale in diverse applicazioni:

• analisi dell’effetto dei farmaci;
• verifica della mutagenicità e cancerogenicità delle sostanze;
• studio dell’espressione genica;
• produzione di OGM, organismi geneticamente modificati;
• produzione di anticorpi monoclonali;
• produzione proteine ricombinanti;
• produzione vaccini;
• studio della risposta immunitaria;
• studio dei processi di base delle cellule (replicazione, morte cellulare programmata, necrosi, produzione di energia, duplicazione del DNA).

QUALI STRUMENTI SERVONO NEL WORKFLOW CELLULARE

FASE 1: PREPARAZIONE

• manipolazione sterile delle cellule coltivate in vitro
• ambiente di lavoro pulito per le cellule
• operatore protetto dagli aerosol
• provviste di filtri HEPA

AGITATORI MAGNETICI E VORTEX:

• sospensione delle cellule
• miscela dei reagenti di un test
• miscela di un campione sperimentale e un diluente

• agitazione e miscelazione

BAGNI RISCALDANTI AD ACQUA:

• scongelamento delle criovials contenenti le cellule d’interesse

SISTEMI PER LA PRODUZIONE DELL’ACQUA:

• produzione di acqua di tipo I e II per le soluzioni necessarie in laboratorio

• raccolta del campione

AUTOCLAVI:

• sterilizzazione di soluzioni, brodi di coltura per batteri, puntali, etc.

PIPETTE E PIPETTATORI:

• sterili e monouso
• manipolazione, aliquotazione e trasferimento dei diversi volumi di campione da un supporto all’altro

FASE 2: COLTURA E CRESCITA

• manipolazione sterile delle cellule coltivate in vitro
• ambiente di lavoro pulito per le cellule
• operatore protetto dagli aerosol
• provviste di filtri HEPA

BIOREATTORI:

• produzione su scala pilota
• produzione su scala produttiva

• raccolta del campione

INCUBATORI A CO₂:

• coltivazione delle cellule di mammifero

INCUBATORI MICROBIOLOGICI:

• coltivazione delle cellule batteriche statiche
• dotazione opzionale di sistema di refrigerazione

• coltivazione colture batteriche o di cellule di insetto

ISOLATORI:

• manipolazione campioni di ricerca in ambiente sterile

PIPETTE E PIPETTATORI:

• sterili e monouso
• manipolazione, aliquotazione e trasferimento dei diversi volumi di campione da un supporto all’altro

• CAPPE A FLUSSO LAMINARE:
  • • manipolazione sterile delle cellule coltivate in vitro
    • ambiente di lavoro pulito per le cellule
    • operatore protetto dagli aerosol
    • provviste di filtri HEPA

• CENTRIFUGHE DA BANCO:
  • • gravità fino a 25.000xg con volumi medio-piccoli
    • preparazione di campioni in coltura cellulare, per protocolli di chimica clinica e per la centrifugazione di micropiastre

• gravità fino a 1.000.000xg con volumi piccoli
• centrifughe in grado di raggiungere elevatissimi valori di accelerazione di gravità, idonee per la separazione, preparazione e purificazione dei campioni

SUPERCENTRIFUGHE:

• gravità fino a 100.000xg con volumi medi
• centrifughe da pavimento ad alta capacità, in grado di processare fino a 4 o 6 litri

• gravità fino a 10.000xg con volumi grandi
• sviluppo e implementazione di metodi di bioprocesso di raccolta, separazione e purificazione ad alta qualità che richiedono riproducibilità e tracciabilità corsa dopo corsa

PIPETTE E PIPETTATORI:

• sterili e monouso
• manipolazione, aliquotazione e trasferimento dei diversi volumi di campione da un supporto all’altro

• automatizzazione e ottimizzazione della riproducibiltà delle diverse fase di lavaggio
• a strip o a piastra completa

LETTORI MULTI-MODE: Gestione delle letture in

• assorbanza
• fluorescenza
• luminescenza

• analisi in tempo reale del processo metabolico delle cellule in vivo
• misurazione consumo di ossigeno
• misurazione acidificazione cellulare

DISPENSATORI DI MICROPIASTRE:

• dispensazione di campioni/reattivi

SISTEMI DI IMAGING:

• ottenimento di immagini delle cellule in tempo reale

• coltivazione delle cellule batteriche statiche

CITOFLUORIMETRI:

• rilevazione, identificazione e conteggio di specifiche cellule/particelle all’interno di una popolazione cellulare/sospensione di materiale biologico
• identificazione strutture intracellulari
• studiare processi biologici, sia fisiologici che patologici

• conservazione di reagenti, terreni di coltura, DNA, vaccini, farmaci, etc.

ULTRACONGELATORI -80 °C:

• conservazione a lungo termine di DNA, RNA, ceppi batterici, vaccini, etc.

• stoccaggio a bassissime temperature, in alternativa allo stoccaggio in azoto liquido, di linee cellulari e materiale sensibile

CONGELATORI A DISCESA PROGRAMMATA:

• preparazione dei campioni cellulari prima della conservazione criogenica, garantisce la massima vitalità delle cellule, secondo procedure standardizzate e ripetibili

• sistemi di stoccaggio in vapori d’azoto per conservazione a lungo termine delle cellule.
• disponibili in diverse capacità, a riempimento manuale o automatico

SISTEMI DI MONITORAGGIO:

• monitoraggio 24/7 di temperatura e altre grandezze chimico-fisiche
• tecnologia LoRaWAN